无镜检定量转染效率

哺乳动物细胞中的转染方法用于引入或改变细胞中的遗传物质，通常需要进行更大规模的实验研究，如稳定的细胞系生产，研究基因调控，突变分析或蛋白质的大规模生产。

转染方法的成功率通常低于100%;细胞类型和靶基因类型会影响成功率。因此，测量转染效率是很重要的，它报告了细胞群中表达感兴趣的转染基因的细胞的百分比。

为了确定转染效率，编码可量化产物的报告基因通常附着在感兴趣的靶基因上。报告基因通常是荧光蛋白、酶或可随后用酶法测定的底物。

荧光蛋白具有优势，因为它们可以在活细胞中测量;这种方法通常使用显微镜或单细胞流式细胞仪分析进行评估。这些方法虽然有效，但却是劳动密集型的，需要昂贵的专业设备。

多模微孔板阅读器具有荧光、发光和紫外(UV)可见吸收能力等VANTAstar®LABTECH可以提供一种易于使用，具有成本效益的替代方法来测量这些测定。

这可以通过量化野生型(WT)-HeLa细胞与表达GFP的HeLa细胞的已知比例来证明。将2万个细胞按0% (WT Hela细胞)到100% (GFP Hela细胞)的不同比例进行了镀膜。用Hoechst 33342法测定GFP信号和细胞总数。

VANTAstar使用直径为6毫米的15 x 15矩阵扫描和底部读取检测，用于捕获GFP和Hoechst 33342信号的荧光。VANTAstar的荧光团库可用于所有常见蛋白质和染料的波长预设。VANTAstar的LVF单色仪™提供了从紫外到红外(IR)范围内测量荧光蛋白和染料的完全灵活性，具有行业领先的灵敏度限制。

GFP荧光信号与GFP标记细胞的百分比呈线性关系，精度r2=0.9997，精度CV为10.5%。一致的Hoechst 33342信号，证实了电镀和总单元数的可靠性。

VANTAstar等多模式酶切板阅读器可自动替代显微镜检测转染效率和其他基于细胞的检测。VANTAstar的灵活的LVF monochroor™设计使用户能够选择最佳的检测方法，而不需要在检测灵敏度上妥协。除了这些荧光分析，用户还可以在吸光度和发光方面选择不同的分析读数，并可以控制微孔板阅读器中的环境，设置温度，震动和气体浓度，以保持活细胞样品。

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