色谱法
技术注意:改善您的HIC分析的策略
9月15日2022年
疏水相互作用色谱(HIC)是一种分离模式,用于分析诸如抗体 - 药物偶联物(ADC),单克隆抗体(MABS)或蛋白质的生物分子。根据其表面疏水性的差异,类似于相反的相(RP)色谱法,分析物是分离的。但是,一个很大的优势是分析物保持其原始结构和功能性,使HIC成为完整蛋白质分析或蛋白质纯化的有用分离模式。
HIC利用分析物和疏水固定相之间发生的可逆相互作用,通过施加抗盐梯度,通过施加盐梯度。梯度开头的高盐浓度增强了靶分子与固定相之间的疏水相互作用,从而导致其保留。通过降低盐浓度,相互作用的强度会削弱和分析物洗脱。
在这个新的技术说明通过YMC,您将学习有关以下内容的见解:
- 如何使用升高温度和高初始盐浓度来增加保留率
- 盐浓度对样品沉淀的影响
- 通过选择右pH来改善疏水相互作用
- 较浅的梯度如何提供更高的分辨率
- 有机修饰符对峰形和保留的影响