色谱法
采用RP或NP条件的高效液相色谱法分析磷酰胺
2022年4月19日
最大的灵活性与YMC-Triart
合成的寡核苷酸是非常有前途的候选生物制药在广泛的疾病。这就是为什么沉默RNA (siRNA)、信使RNA (mRNA)和反义寡核苷酸(ASOs)等核酸疗法在当前的研究中获得了相当多的关注。
磷酰胺是化学合成寡核苷酸、核苷酸短片段和类似物的重要组成部分。为了防止在寡核苷酸合成过程中残留的反应位点如羟基和氨基发生任何副反应,必须保护这些基团。因此,高活性的原生核苷酸被修饰成四个不同的保护基团。图1显示了以腺苷基磷酰胺为例的保护组。
在化学寡核苷酸合成过程中,可能会发生错误,这就是为什么磷酰胺的纯度需要密切监测。在一个新的应用程序注意两种不同的分离模式-反相(RP)和正相(NP) -被用于分析四种不同的磷酰胺。由于这些分子的复杂性,可以使用不同的相互作用,以实现合理的保留和分辨率。由于磷酰胺在磷原子上有一个手性中心,存在两个同分异构体,从而在色谱图中出现双峰。
所有分离都使用高稳健性YMC-Triart列是现代生物色谱应用的理想选择。RP分离使用YMC-Triart C18色谱柱,产生尖峰。一个YMC-Triart SIL含有三乙胺作为添加剂的流动相(图2中的例子)。对所有化合物都获得了良好的分辨率。