抗人促甲状腺激素的纯化、还原和鉴定及其高灵敏度免疫pcr方法的建立

测量促甲状腺激素(TSH)的循环水平是早期发现甲状腺疾病，特别是原发性甲状腺功能亢进症的第一线测试。虽然目前第三代TSH测定法的功能灵敏度有所提高，但在实际操作中，医学实验室通常无法报告低于0.05μIU/mL的水平。免疫聚合酶链反应为卫生署建议的降低检出限和提高功能敏感性带来了希望。在本研究中，我们优化了ELISA方法(用于检测低水平TSH的免疫pcr方法的第一部分)的条件，并建立了纯化、还原和鉴定检测器人抗TSH抗体的最佳条件。抗体减少了，我们能识别出来吗?s在HPLC运行14分钟时达到峰值，而完整抗体的保留时间为18分钟。抗体还原后的潜伏期是实验的关键部分。它应该保持尽可能短，以防止减少片段重新组合。还原的抗体需要偶联到单链寡核苷酸(ssDNA)。酶联免疫吸附试验的最低功能灵敏度为0.02μIU/mL TSH，在TSH浓度0 ~ 2.6μ iu /mL范围内，测定结果呈线性关系。